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三种消毒剂对肠道致泻菌最小杀菌浓度的测定

发布:多吉利        来源:www.duojili.cn  
三种消毒剂对肠道致泻菌最小杀菌浓度的测定
提要  为对防制感染性腹泻的消毒工作提供依据,用悬液定性杀菌试验,测定了稳定性二氧化氯,过氧戊二酸,氯己定对从临床分离的肠出血性大肠杆菌和三株气单胞菌作用1min10min的最小杀菌浓度。结果,二氧化氯化用1min10min杀菌所试菌的最低浓分别为大于等于920mg/L和大于等于701mg/L;过氧戊二酸者分别为大于等于5500mg/L和大于等于5170mg/L;氯己定者分别为大于等于9000mg/L和大于等于792mg/L。说明所试3种消毒剂对4株临床分离到的肠道致泻菌均有良好杀灭作用。
关键词   致泻菌  最小杀菌浓度   消毒剂抗力
  
   为对防制感染性腹泻的消毒工作提供依据,我们测定了稳定性二氧化氯 ,过氧戊二酸,氯己定对肠出血性大肠杆菌和气单胞菌作用1min10min的最小杀菌浓度。现将结果报告如下。
1 方法
1.1   菌悬液的制备
      试验菌为大肠杆菌,亲水性气单胞,温和气单胞菌,豚鼠气单胞菌,大肠植树菌。取其第3-14代普通营养琼脂斜面37℃  24h培养菌苔,用.03mol/L磷酸盐缓冲液洗下,以粗滤纸过滤,取滤液存于4℃部箱。备用。
1.2 1min和10min最小杀菌浓度的测定
采用悬液定性杀菌试验。试验时,取10支中试管,按消毒剂浓度由高到低,向前9支管分别加2ml经倍比稀释至试验浓度的消毒液。向第10管加2ml无菌蒸馏水,然后每管加菌悬液2ml,立即摇匀并计时。作用至规定时间(1min或10min),吸2ml菌药混合液,移人含2ml中和剂(经预试验选定氯己定用含卵磷脂0.3%(g/ml),吐温80.3%(ml/ml)的溶液作中和剂,二氧化氯和过氧戊二酸用含硫代硫酸钠0.3%(g/ml)的溶液作用中和剂)的管中,混匀。中和作用10min,取0.5ml最终样液接种营养肉汤。于37℃培养24h,观察结果。以培养液清澈透明为无菌生长,不长菌的消毒剂最低浓度为最小杀菌浓度。如果界限不清,吸0.5ml作倾注培养,观察菌落生长情况,以作进一上判断。为便于对比,以大肠杆菌为大肠杆菌代表,将测得对其作用10min的最小杀菌浓度除对某菌的10mih最小杀菌浓度,即得大肠菌系数。试验设定空白肉汤管,肉肠管+中和剂(0.5ml)+菌悬液(0.1ml)等对照。
2 结果
2.1 二氧化氯
经试验,作用1min ,二氧化氯对大肠杆菌的最小杀菌浓度最低,对其余各菌的最小杀菌浓度没有差别;作用10min,对亲水性气单胞菌的最小杀菌浓度最高,以下依次为温和气单胞菌的豚鼠气单胞菌。
2.2 过氧戊二酸作用1min,对各试验菌的最小杀菌浓度没有差别;作用10min,对亲水性气单细胞菌的最小杀菌浓度最高,对豚鼠气单胞菌,温和气单胞菌者次之,对大肠杆菌者较低。两个菌最小杀菌浓度有差别时,用T检验两两比较,均为p小于0.05。
2.3 结果表明,作用1min或10min,氯己定对的最小杀菌浓度均最高,对气单胞菌属细菌者次这,对大肠杆菌者较。两个菌最小杀菌浓度有差别时,用检验两两比较,均为P小于0.05.
3 讨论
最小杀菌浓度测定结果表明,以稳定性二氧化氯,过氧戊二酸,氯己定作用1min或10min,和亲水性气单胞菌,豚鼠气单胞菌,温和气单胞菌均有良好杀灭作用。作用1min与手的卫生消毒时间相一致,作用10min与一般物品表面消毒时间相近。因此,本结果可作为预防此类致病菌感染使用消毒液浓度的起点,通过进一步实验,得出合理的消毒剂量。
结果还表胆,所试4株临床分离到的肠道致泻菌的大肠杆菌系数都大于1,即其对上述3种消毒剂的抗力略强于大肠杆菌;而大肠杆菌是选入《消毒技术规范》作为肠道菌的代表菌株,因此,在消毒某些特异菌时,需实验验证适宜剂量。
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