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浓缩过滤——超声振荡法检测水中藻类

发布:多吉利        来源:www.duojili.cn  

浓缩过滤——超声振荡法检测水中藻类

摘要:介绍了一种快速检测水中藻类的方法:采用浓缩过滤方法收集水体中藻细胞,经超声振荡后在显微镜下进行计数。与传统方法的对比试验结果表明,该方法水样用量少,操作方便、准确快捷,适用于水中藻类的检测。

关键词:藻类计数;浓缩;过滤;超声

      目前国内普遍采用的水体中藻类的测定方法是:在1L水样中加入15ml鲁哥氏液后固定在一容器中,自然沉降24h后利用虹吸方法除去上清液,将剩余的20-25ml沉淀物转移并定容至30-50ml,然后取0.1ml 滴入血球计数板,在10×40显微镜下进行镜检计数。此方法所需水量较多,如需采多个水样则采集和运送的工作量较大,且在水样沉积之后还经过虹吸和多次冲洗转移,操作不便,还增加了出现误差的几率。笔者在研究富营养水体藻类的去除时,借鉴部分水厂的经验,采用浓缩过滤法测定了藻类的含量。

1 材料设备与方法

1.1 材料设备

XZ型旋片式真空泵;XSP——8C型三目生物显微镜;KS-18D超声清洗机;12um滤膜等。

试验水样为同济大学三好坞、杨浦公园与和平公园湖水。

1.2 方法

1.2.1 浓缩过滤

准确量取200ml水样,经滤膜抽滤,将藻细胞截留于滤膜上。取下滤膜,放入可封闭的玻璃管中。

1.2.2 超声振荡

用移液管取20 ml 蒸馏水于玻璃管中,将玻璃管旋紧紧放入超声清洗机中振荡10min,将滤膜上的藻细胞振荡漾至蒸馏水中,此悬液用于下一步镜检/

1.2.3 镜检计数

取清洁干燥的血球计数板与盖玻片,用胶头滴管吸取充分摇匀的悬浊液,滴加到血球计数板的计数室内,小心盖上盖玻片。在400倍显微镜下按照藻细胞个体形态与色素颜色镜检计数,观察四组数据并取平均值。如果镜检发现计数室内藻类数量较少,可以适当增大浓缩过滤时的取样量。

2 结果与讨论

2.1 方法比较

2.1.1 与常规检测法的对比试验

在三好坞及上海杨浦公司、和平公署分别取湖水水样,采用浓缩过滤法和传统的鲁哥氏液固定沉、降法进行了藻类细胞检测对比试验。

     由对比可看出,两种方法的测定结果没有显著差异,符合水体浮游生物检测的质量要求。

2.1.2 浓缩倍数对检测结果的影响

采集三好坞湖水,改变水样体积,用不同的浓缩倍数进行浓缩。由结果果可看出,不同浓缩倍数对测定结果的影响并不明显,浓缩过滤方法的测定结果均高于传统方法,可能是因为三好坞水体有丝状藻类,其断裂造测定值上升,另外传统方法在转移中不彻底也带来一部分误差。在检测中,可以根据水体藻细胞的浓度择合适的浓缩倍数。

2. 2 试验因素分析

2.2.1 滤膜的影响

水体中绝大部分藻类的直径或宽度都在2 um以上,选用的滤膜可以将水体中的藻细胞截留。将经过一次超声振荡漾的滤膜取出,重新加入20ml蒸馏水,振荡10min后进行镜检,发现只检出极个别的藻细胞,可见经过一次振荡后,滤膜上截留的藻细胞基本上已完全脱离。

2.2.2 超声的影响

使用实验室培养的铜绿微囊藻纯藻水取20ml超声振荡10min后,和未经振荡的纯藻分别镜检,对比发现,没有细胞破碎的现象。文献中采用超声波破坏藻细胞的研究中所选用的超声细胞破碎仪功率都很大,处理条件也很复杂,而该方法则因选用低功率超声清洗机而不易造成细胞的破裂。

3 结论

采用浓缩过滤方法对藻类进行检测计数,经试验验斑点,该方法所需水样少、操作简单、准确、快捷,可以应用于生产和科研检测。

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