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5家实验室含氯消毒剂含量及杀菌效果室间比对试验报告

发布:多吉利        来源:www.duojili.cn  

5家实验室含氯消毒剂含量及杀菌效果室间比对试验报告

[摘要]  目的:为了解含氯消毒剂在不同实验室间有效氯含量测试值及杀菌效果。方法: 5家不同实验室按照相同的实验方法对有效氯含量及杀菌效果进行了室间比对。结果: 5家实验室的有效氯含量测试结果平均值为47.1% ,标准差为0.71,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、枯草杆菌黑色变种芽孢的杀菌效果,高剂量组杀灭对数值较接近,低剂量组则偏差较大。结论:不同实验室采用相同方法测试含氯消毒剂,有效氯含量结果较一致,杀菌效果偏差相对较大,应采取相应的措施进一步控制检测质量。

[关键词]  含氯消毒剂; 有效氯; 杀菌效果

为观察不同实验室对含氯消毒剂有效氯含量及杀菌效果测试结果的影响, 5家实验室分别对以三氯异氰尿酸为主要成分制成的泡腾片进行了有效氯含量测试及悬液定量杀菌试验,现将结果报告如下:

1 方法

1.1 有效氯含量测试

采用碘量法。将试样充分研碎后,称取适量置入250 ml碘量瓶中,分别加入2 mol/L 硫酸溶液、100 g/L 碘化钾溶液,加盖后暗处放置5 min,以0.0500~0.1000 mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定,试验重复2次。依据硫代硫酸钠标准溶液消耗的体积数计算试样中的有效氯含量 。

1.2 悬液杀菌试验

试验时将以含0.1%胰蛋白胨的生理盐水( TPS)制备的菌液0.5 ml加入无菌试管中,再加入0.5 ml 3%白蛋白水溶液,混匀,加入以标准硬水配制的消毒剂4 ml (阳性对照组为TPS) ,混匀,在19~21℃下作用至预定时间,取0.5 ml菌药混合液加入盛有4.5 ml中和剂(经筛选统一选用含1.0%硫代硫酸钠、0.5%吐温- 80 的TPS)的试管中,混匀,中和作用10 min,取该液以胰蛋白胨大豆琼脂培养基倾注法培养作活菌计数。细菌繁殖体(大肠杆菌8099、金黄色葡萄球菌ATCC6538、铜绿假单胞菌ATCC15442 ) 检测时于37℃培养48 h,检测枯草杆菌黑色变种(ATCC9372)芽孢则培养72 h,实验重复3~6次。

2 结果

2.1 有效氯含量测试结果

5家实验室测试的试样有效氯含量分别为46.5%、47.9%、47.8%、47.2%、46.1%,平均值为47.1%,标准差为0.71。

2.2 对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭实验结果

5家实验室中, 4 家的试验菌株来自中国军事医学科学院, 1家来自国家微生物菌种保藏中心,均为第四代蒸馏水悬浮物。实验结果显示,高剂量组( 5000 mg/L 有效氯作用30、40 min, 5000 mg/L 有效氯作用40 min)杀灭对数值较接近,其余剂量组试验结果相差较大, 5000、4000、3000 mg/L 有效氯作用10 min 剂量组, 杀灭效果均相差4 个对数值左右,3000 mg/L 作用20、30、40 min 剂量组,杀灭效果相差程度也较大。其中试验结果明显偏离平均值者并非菌株来源不同所致。

2.3 对细菌繁殖体的杀灭实验结果

5家实验室中, 4 家的试验菌株来自中国军事医学科学院, 1家来自国家微生物菌种保藏中心,其中4家采用4~6代营养琼脂斜面培养物, 1家采用6~8代营养琼脂斜面培养物。实验结果显示,高剂量组(750 mg/L有效氯作用0.5、1.0、1.5、2.0、3.0 min, 500 mg/L 有效氯作用1.0、1.5、2.0、3.0 min)杀灭对数值较接近,其余剂量组试验结果相差较大, 250 mg/L 有效氯作用各时间组,杀灭效果均相差1个对数值以上。其中试验结果明显偏离平均值者非菌株来源及采用培养代数不同所致。

3 讨论

碘量法是经典的氧化还原法之一,本次试验结果显示,该法用于测试含氯消毒剂中的有效氯含量,不同实验室之间测试结果较为一致, 5家实验室测试同一试样有效氯含量分别为46.5%、47.9%、47.8%、47.2%、46.1% ,平均值为47.1% ,标准差为0.71。这一结果为含氯消毒剂鉴定杀菌试验提供了技术保障。

消毒试验中,影响试验室杀菌效果的因素很多,如作用浓度、作用时间、作用温度、菌株的来源及培养代数、菌悬液配制液的原料产地、恢复培养基的性质等均可影响杀菌效果,诸多影响因子中,因上述有效氯含量测试的准确性,其影响性可以基本排除;作用时间、作用温度以及秒表、水浴温度控制所用的仪器均经技术监督部门检定合格,其导致的试验误差应在合理范围内;导致本次室间比对结果相差较大的原因,可能与菌悬液制备液所用的小牛血清白蛋白有关,因含氯消毒剂的杀菌效果对有机物较为敏感,不同质地的小牛血清白蛋白对试验结果的影响应有所差别;各试验室虽均采用TSA (胰蛋白胨大豆琼脂培养基)作为受试微生物的恢复培养基,但是所用培养基的来源不同,可能对试验结果有所影响 ;而试验菌株在使用、保存过程中,其对外界物理、化学等因子的抵抗力会有所变化,此次试验所用菌株的保存、使用要求虽按照消毒技术规范(卫生部, 2002年版)进行,但不同实验室、不同实验人员对该规范的理解有所不同,尤其在使用菌株的保存、传代等方面,各实验室操作有所差别,可能导致了微生物抗性的变化,因而使不同实验室间测试结果差别较大。

近年来,随着计量认证和国家实验室认可工作的进一步开展,各地对理化、微生物、毒理等实验室的质量控制工作已非常重视,室内、室间质控工作已融入到日常检测工作中,但是因消毒效果的试验的影响因素多、工作量大,尤其缺乏标准物质而无法提供统一的判定标准,质量控制工作开展有一定的难度,使得不同实验室间的测试结果差别较大,在一定程度上影响了试验结果的可信性,也给同类产品的质量优劣判定带来一定的难度,因而设立严格而易于统一、操作性强的试验方法显得尤为重要。

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