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明胶溶胀介绍对细菌测定的影响

发布:多吉利        来源:www.duojili.cn  

明胶溶胀介绍对细菌测定的影响

食用明胶的微生物学检查现已列出草案规则。试行过程中使用不同的溶胀介质,对细菌的计数也不同,国内已有报告比较了用盐水和肉肠溶胀后所测得的含菌量。国外也有用蒸馏水溶胀胶样的。各介质对细菌窨是否有损害、保护,或滋长的作用,以及如何真实反映明胶的含菌量,已成为共同关心 的问题。本文在蒸乌黑水(以下简称D)、盐水(以下简称S)和,肉汤(以下简称B)等介质中加入胶样,以及各介质中不加胶样对含菌的影响,进行了初步研究。

实验

一   材料

1   溶胀介质

1)市售蒸馏水;(2)肉蒸馏水配成0.85%NaCl生理盐水;(3)肉汤培养基

2   菌种

苏州化工厂NO.8301NO.83.2两批胶样中分离出的细菌共8株,取其中101号、103号、105号、2014株进行实验。

3 培养基

肉汤和营养琼脂,均校正PH7.6

二    方法

 1    介质中不加胶样

      (1)标本制备:于每瓶50mlDSB三种介质中,分别加入经1:500稀释的18小时肉汤培养物。

       (2)流布法培养及计数:取上述标本0.5ml分别以同样介质进行10-1、10-2、10-3稀释,并取该稀释液0.5ml流布于琼脂平板表面,在4℃下待干后,于37℃孵育24小,计数其菌落数。共分四组:(1)于4℃冰箱1小时后流布孵育。(2)于37℃水浴20分钟后流布、孵育。(3)于是37℃30分钟,再4℃、18小时后流布、孵育。(4)对照组:未经任何处理立即流布、孵育。

2   介质中加胶样

标本系50mlD、S、B三种介质各加入胶样5克。经121℃15分钟灭菌,备用。稀释菌液及流布培养计数均如上述。本实验共分三组:(1)于4℃冰箱1小时,37℃水浴20分钟后流布、孵育。(2)于37℃30分钟,4℃18小时后流布、孵育。(3)对照组:同上述。

结果

一   从表1中看出,蒸馏水对四种细菌均有不同程度地损害作用;盐水除了对201号菌损害较大外,对其余三种菌虽也有损害作用,但比蒸馏水的损害作用小;肉汤对四种细菌均有保护和滋长作用,尤其对201号菌滋长作用更大。

二   从表2看出(1)在4℃、1小时和37℃、20分钟的条件下,D+G组对四种细菌的损害作用比表1明显降低;S+G组对四种细菌均无损害作用,菌量波动较为稳定;B+G组对四种细菌有保护和滋长作用,尤其对201号和105号菌分别增长25%和240%的菌量。

(2)实验时间延长到37℃、30分钟和4℃18小时的条件下,三种介质加明胶后均增长菌量,但B+G组比其他两组增长更明显。

(3)三种介质加胶样后对103号菌的菌量均无明显增长。

讨论与小结

一、 表1的D水和S水对细菌均有不同程度的损害作用,加入胶样后即减弱到接近无损害作用。其原因我们也进地了研究;(1)D水和D水配成的S水,均在PH5.0-5.4范围内,加入明胶后增至PH6.4。我们又将分离6株进行了不同PH的生长试验。结果是6株菌种在PH4.0和ph5.0 均不能生长。因此D水和S水的损害作用看来是由于PH的影响引起的。(2)D水由于低渗,对细菌具有损害,但加入明胶后已不存在低渗现象。这也是使D水溶胀明胶后对菌损害不大的原因之一。我们认为用盐水溶胀胶样必须校正PH至7.0左右较适宜(注:本实验明胶PH为弱碱性)。

二、 本实验在37℃溶解时间为20-30分。在实际操作中要超过数倍于此时间,因此其菌量必然相应增加。在表2中,肉汤加胶样组增长的菌量也必然比其余两组大。原因是,由于在明胶原有一定营养的基础上,又加上肉汤的营养,使细菌更易于生产繁殖。

三、 从分离出的8株菌株中,尤以芽孢杆菌、革兰氏阴性球杆蓖笔葡萄球菌量占多数。有些菌株在4℃环境中也有一定的增殖。因此对明胶生产和成品进行细菌学调查很有必要,然后进行理化因素或生物因素的敏感试验,提出处理污染细菌的有效措施将有其实用价值。

四、 本文结果得出如下印象:

(1) 本实验三种介质中,以盐水溶胀明胶为目前较适宜的介质。

(2) 肉汤加入明胶后,其滋长作用比其余两类介质大。

(3) 明胶不仅对细菌有保护作用,而且对某些细菌提供一定的营养,促其增殖。

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